Braf-мутация при меланоме (браф): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

По международным стандартам анализ проводится в обязательном порядке на 3-й и 4-й стадиях рака. Возможна диагностика на 1-й и 2-й стадии, если врач наблюдает быстрое течение болезни. Для выявления гена braf мутации проводятся молекулярные пробы, а именно тест на V600E и полимеразная цепная реакция в режиме реального времени. Алгоритм сдачи биопробы:

  1. Используется ткань опухоли, которая была взята у больного путем хирургического иссечения для гистологического исследования. При этом могут использоваться первичные ткани с меланомой на коже и метастазные образования.
  2. Материал для анализа доставляется в лабораторию в формалине или сразу же после операции.
  3. Лаборант фиксирует на стеклах парафиновые блоки. При этом должна быть четко видна граница между здоровой и больной тканями образца. Если это условие выполнить невозможно, используют парафиновые блоки с генетическим материалом.

Такое исследование особо важно для пациентов, у которых нельзя удалить раковые ткани. Если в городе проживания пациента это исследование не проводится, больной может самостоятельно взять парафиновый блок с образцом клеток и перевезти его в город, где этот анализ возможен. Для обеспечения точности анализа должно быть более 20% злокачественных клеток.

Своевременная диагностики BRAF мутации меланомы стоит пациенту жизни.

В лаборатории генодиагностики «БиоЛинк» используется метод аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени с целью выявления мутации V600E/K/E2/D в гене BRAF. Чувствительность теста позволяет выявить наличие 1% мутантной ДНК BRAF в опухоли, что значительно выше чувствительности прямого секвенирования ДНК.

К нам за помощью обращаются пациенты из разных стран, и этому есть вполне обоснованные причины. Как уже говорилось выше, при меланоме (и других онкологических заболеваниях) очень важно вовремя диагностировать процесс и провести лечение при помощи как традиционных средств, так и современных препаратов, зачастую не применяющихся в других клиниках.

Мы предлагаем своим пациентам:

  • Большое количество методов ранней диагностики (в том числе диагностические операции), не применяемых в других странах из-за отсутствия соответствующего оборудования и сертификации необходимых препаратов.
  • Прием у дерматоонкологов — врачей с узкой специализацией и опытом в лечении именно меланомы.
  • Хирургическое лечение при помощи новейших, минимально травмирующих методов, иммунотерапию, таргентную терапию современными лекарствами.
  • Ведение пациентов на поздней стадии заболевания.

И, конечно же, при обращении в нашу клинику мы гарантируем доброжелательное отношение персонала, комфортные условия и создание психологического климата, помогающего в борьбе с болезнью.

Что такое Вемурафениб, Дабрафениб и Траметиниб

Препараты Зелбораф/Вемурафениб (Zelboraf/vemurafenib) (Roche), и Тафинлар/ Дабрафениб (Tafinlar/ dabrafenib) (GlaxoSmithKline) являются ингибиторами киназной активности BRAF. Эти ингибиторы селективно подавляют киназную активность белка BRAF с мутациями в положении V600 по сравнению с белком без мутаций.

Клинические испытания показали высокую эффективность препаратов Вемурафениб и Дабрафениб для химиотерапии метастатической меланомы кожи с мутациями V600E или V600K. В ЕЭС Европейским медицинским агенством (ЕМА) разрешено применение Вемурафениба и Дабрафениба для химиотерапии метастатической меланомы с мутацией BRAF-V600.

В США Управление по надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств (FDA) разрешило применение этих препаратов для лечения пациентов с метастатической меланомой с мутацией BRAF-V600E.

Кроме меланомы кожи клинические исследования показали активность Вемурафениба и Дабрафениба и при других солидных опухолях с мутацией BRAF-V600E (раке щитовидной железы, немелкоклеточном раке легких).

Мутация BRAF V600E при метастатической меланоме кожи является показанием к применению препаратов Вемурафениб и Дабрафениб в США.

В ЕЭС показания к применению не ограничиваются мутацией V600E, а включают и более редкие мутации в положении V600.

В клинических испытаниях мутация BRAF V600E коррелирует с наиболее высокой чувствительностью меланомы кожи к лечению препаратами Вемурафениб и Дабрафениб.

Рак кишечника

Определение Онкомаркера BRAF V600 при колоректальном раке необходимо, чтобы  отличить наследственный неполипозный рак — колоректальную карциному (HNPCC) от спорадического колоректального рака.Разграничение этих двух заболеваний имеет важное значение. Дополнительно выполняют тест на онкомаркер MSI-H.

Выявление микросателитной нестабильности (MSI) — важный фактор в понимании механизма колоректального неполипозного наследственного рака.

Полная расшифровка генома — дорогое удовольствие, поэтому генетическое тестирование может быть предложено только выборочно.

Пациенты могут быть отобраны с помощью предварительного теста BRAF V600Наличие мутации BRAF означает, что опухоль нечувствительна к некоторым лекарствам — ингибиторам эпидермального клеточного роста (EGFR).

Материал для исследования

Онкомаркер определяют в ткани опухоли. Материал для исследования должен быть доставлен в лабораторию в свежем или замороженном состоянии или в формалине, парафине.Чаще всего применяют технику определения — реакцию полимеризации в реальном времени, реже различные модификации определения ДНК

В качестве материала для анализа может использоваться ДНК опухолей, выделенная из свежезамороженной ткани или ткани фиксированной формалином и заключенной в парафин.

Эффективность BRAF таргетного лечения

Установлено, что выявление мутации в гене является одним из возможных критериев эффективности терапии меланомы и ее вторичных метастатических очагов.

Определить мутацию необходимо для проведения целевой терапии пациентов с метастазирующей меланомой, которые могут положительно реагировать на БРАФ таргетное лечение.

Если диагноз меланомы установлен на ранних этапах заболевания, то эта опухоль достаточно хорошо реагирует на специфическое лечение.

  • Почему повышается концентрация глюкозы и происходит нарушение кальциевого и азотного баланса.BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовЧем рискуют лежачие больные
  • Гибель организма при злокачественном новообразовании возникает вследствие…BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовС какой скорость растет опухоль
  • Как уменьшить вероятность появления рецидивов. В чем ключевая роль иммунной системы.BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовПо каким причинам рак может ?
  • Какие виды рака не поддаются излечению и какие экспериментальные методы наиболее перспективныBRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовЭффективное лечение рака
  • Анализ на молекулярный биомаркер наиболее точен чем гистологическое или иммуногистохимическое исследованиеBRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовКак узнать поможетли химиотерапия
  • При восстановлении функций иммунитета появляется возможность уничтожить опухолевую ткань.BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовСекреты иммунотерапиирака
  • Как добиться равновесия между противоопухолевой эффективностью химиотерапии и активностью иммунной системы.BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовКак убить раковую клетку
  • Возможно спасти и значительно продлить жизнь, если вовремя выявить неотложные онкологические состояния.BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатовПомощь тяжелобольным

Предсказатели эффективности применения таргетного лекарства – определённые мутации генов в ДНК раковой клетки. При мутации в меланоме гена CKIT будет польза от таргетного иматиниба. При наличии в злокачественной меланоме

  • мутации гена BRAF ожидается позитивный результат от использования
  • кобиметиниба или траметиниба вместе с вемурафенибом или дабрафенибом.
  • Таргетные препараты используются только при наличии в клетке маркёров – мутаций, если в течение месяца после операции не удаётся определиться с
  • генетическим статусом, то считается, что мутация отсутствует.

Источник: https://marta2.ru/braf-mutatsiya-melanome/

Мутация гена BRAF при меланоме

Частота мутаций в гене BRAF при меланоме кожи, по данным разных исследователей, варьирует от 30-40% до 70%.

Наиболее распространенной (69-94% случаев) разновидностью BRAF-мутаций является V600E – замена валина на глутамин в 600-м кодоне. Эта мутация представляется доминирующей, но далеко не единственной разновидностью нарушений BRAF [14, 15].

Второй по частоте является мутация V600К – ее частота может достигать 5-10%. Мутации V600D и V600R встречаются значительно реже.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Cтатус мутации гена BRAF и выбор тактики лечения

За последние годы достигнуты значительные успехи в изучении патогенетических основ развития меланомы и сделан огромный шаг к выявлению новых потенциальных молекулярных мишеней.

Открытие молекулярной мишени BRAF и понимание ее роли в патогенезе меланомы легли в основу разработки нового класса препаратов – низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF.

Использование этих препаратов позволяет блокировать патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и, таким образом, тормозить развитие опухоли.

Следует особо отметить, что воздействие данной группы препаратов на опухолевые клетки с нормальной последовательностью BRAF, напротив, может сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Этот феномен свидетельствует об исключительной важности достоверной диагностики статуса гена BRAF.

BRAF ингибиторы не должны использоваться в тех случаях, когда статус мутации BRAF не определен или мутация не обнаружена!

Следует подчеркнуть, что ингибиторы BRAF и MEK зарегистрированы к применению только для терапии метастатической формы меланомы. В настоящее время отсутствуют данные по использованию ингибиторов BRAF и MEK в адъювантном режиме, поэтому они не могут быть рекомендованы пациентам, перенесшим (условно-)радикальное удаление первичной меланомы и метастических очагов.

В рандомизированных клинических исследованиях ингибиторы BRAF – вемурафениб и дабрафениб – продемонстрировали значительное преимущество по сравнению со стандартной химиотерапией в отношении частоты объективных ответов, продолжительности жизни без прогрессирования и общей продолжительности жизни у пациентов с метастатической меланомой и подтвержденной мутацией гена BRAF, ранее не получавших системного лечения (см. рис. 2). Полученные результаты привели к пересмотру международных клинических рекомендаций, которые включили эти препараты в современные стандарты лечения метастатической меланомы кожи с BRAF мутацией.

Результаты последних исследований показали, что двойное ингибирование сигнального пути MAРK, которое достигается при одновременном использовании ингибиторов BRAF и MEK, обладает более высокой эффективностью по сравнению с ингибитором BRAF в монорежиме.

Важно отметить, что помимо более высокой эффективности комбинация препаратов снижает вероятность развития резистентности к проводимой терапии и отдельных нежелательных явлений, в том числе плоскоклеточного рака кожи.

В рамках клинического исследования coBRIM было подтверждено, что комбинированная терапия с использованием препаратов вемурафениб и кобиметиниб в 90% случаев позволяет достичь ответа на терапию у больных BRAF+ метастатической меланомой.

У каждого второго пациента более года отсутствовали признаки прогрессирования заболевания, а общая выживаемость приближалась к 2 годам (рис. 3).

Сходные результаты были продемонстрированы в исследованиях дабрафениба и траметиниба. В частности, исследование COMBI-V (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом) продемонстрировало значимой увеличение общей продолжительности жизни у пациентов, получавших комбинированную терапию, по сравнению с применением вемурафениба без ингибитора MEK (25.

Читайте также:  Папиллома на глазу: список симптомов, причины возникновения, лечение и профилактика патологии

6 мес. vs 18 мес.; рис. 4, табл. 1). В клиническом испытании COMBI-D сравнивалась эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо. Примечательно, что в этом исследовании были зарегистрированы практические идентичные показатели общей продолжительности жизни (25.1 мес. vs 18.7 мес.; рис. 5, табл. 1).

Определение статуса гена BRAF является обязательным компонентом выработки тактики лечения всех пациентов с неоперабельной/метастатической меланомой кожи.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Рисунок 2. Результаты рандомизированного исследования BRIM-3: сравнение эффективности вемурафениба и дабрафениба в 1-й линии терапии метастатической меланомы с мутацией BRAF.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Рисунок 3. Результаты рандомизированного исследования coBRIM: сравнение эффективности комбинации кобиметиниба+вемурафениба и вемурафениба+плацебо в 1-й линии терапии метастатической меланомы с мутацией BRAF.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Рисунок 4. Результаты клинического исследования COMBI-V: (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом).

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Рисунок 5. Результаты клинического испытания COMBI-D: эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо.

Сводные данные по всем исследованиям представлены в таблице 1.

Исследование COMBI-d COMBI-v
Препарат(ы) Д + T Д + пла Д + T В
Кол-во пациентов, n 211 212 352 352
Медиана ВБП, мес. 11,0 8,8 12,6 7,3
Медиана ОВ, мес. 25,1 18,7 25,6 18,0
Медиана ОВ, ЛДГ≤ВГН Нет анализа НД 21,5
Медиана ОВ, ЛДГ>ВГН 10,8 8,9

Сокращения: В – вемурафениб, К – кобиметиниб, Д – дабрафениб, Т- траметиниб, пла – плацебо, НД – не достигнута, ВГН – верхняя граница нормы.

Таким образом, использование BRAF/MEK ингибиторов у пациентов с мМК, имеющей BRAF мутацию, представляет первый успешный пример персонализированной терапии, изменившей представление о мМК как об опухоли, рефрактерной к лекарственному лечению.

Эти препараты пришли на смену химиотерапии и стали новым стандартом лечения меланомы с BRAF мутацией, что подтверждает ранее сформулированный постулат о необходимости разработки различных подходов к лечению для различных молекулярно-генетических подтипов меланомы.

Появляются результаты исследований таргетных препаратов и при других типах меланомы, имеющих альтернативные мутации (NRAS, cKIT).

Можно ожидать, что определение молекулярно-генетического портрета опухоли уже в ближайшее время станет неотъемлимой частью разработки стратегии лечения каждого пациента, имеющего диагноз «меланома».

На сегодняшний день все существующие BRAF и MEK ингибиторы зарегистрированы на территории Российской Федерации и, при соответствующем лекарственном обеспечении, с успехом могут быть использованы для терапии мМК. Профиль безопасности этих препаратов позволяет использовать их в амбулаторных условиях.

Статьи:

  1. Г.Ю. Харкевич. Вемурафениб в лечении метастазов меланомы в головной мозг. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена, 6, 2014.
  2. Г.А. Франк et al, Первое Всероссийское молекулярно-эпидемиологическое исследование меланомы: результаты анализа мутаций в гене BRAF. Архив Патологии, 3, 2014.
  3. С.А. Проценко et al, Современные возможности персонализированной терапии метастатической меланомы кожи. Современная онкология №3, том 16, 2014.
  4. Larkin J et al. Update of progression-free survival and correlative biomarker analysis from coBRIM: Phase 3 study of cobimetinib plus vemurafenib in advanced-BRAFmutated melanoma; Poster presentation at ASCO 2015.
  5. Robert C, et al. Ann Oncol. 2015; 26 (suppl 6) [abstract 3301].
  6. Flaherty K, et al. J Clin Oncol. 2016; 34 (suppl; abstr 9502).
  7. Hauschild A, et al. Poster presented at ESMO 2014, Abstract 1092PD.
  8. Robert, C. LBA4 Oral presentation at ESMO 2015.

 Войтив базу данных

Для того, чтобы отправить материал на диагностику, вы должны быть зарегистрированным пользователем. Если у вас уже есть логин и пароль, то повторная регистрация не требуется.

Регистрацияв программе

Если вы новый пользователь, пожалуйста, пройдите процедуру регистрации.

Источник: http://www.cancergenome.ru/mutations/BRAF/melanoma/

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результата

Ген BRAF участвует в делении клеток. В норме этот процесс также регулируют гормоны и факторы роста. Но в случае мутации такого гена происходит сбой, что провоцирует образование раковых клеток. В основном такие изменения характерны для меланомы. Но возможна и мутация в гене BRAF при других видах рака.

Что такое мутация в гене BRAF

Развитие злокачественных новообразований в основном происходит из-за сбоя в так называемых сигнальных путях. Под последними понимается цепочка, по которой проходит импульс от рецептора к ядру клетки.

К числу подобных сигнальных путей относится МАРК. Импульсы, поступающие от факторов роста и гормонов, принимаются и «ретранслируются» рецептором. Приведенный процесс описывает особенности клеточного деления.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

В случае точечной мутации в гене BRAF, обладающего большей активностью среди всех белков, составляющих МАРК, нарушается передача сигналов по данному пути. Причины, вызывающие подобные изменения, пока не установлены. Из-за таких мутаций белок BRAF приобретает способность самостоятельно активировать сигнальный путь, вследствие чего клетки начинают бесконтрольно делиться.

Такая мутация характерна для следующих видов рака:

  • меланома;
  • папиллярный рак щитовидной железы;
  • немелкоклеточный рак легкого;
  • рак предстательной железы;
  • колоректальный рак.

Открытие BRAF-мутации позволило найти новые препараты для лечения раковых опухолей. Эти лекарства блокируют передачу импульсов по сигнальным путям, за счет чего приостанавливается развитие злокачественного новообразования.

Кому нужно сдать анализ на определение мутации

Анализ BRAF-мутации назначается на третьей и четвертой стадиях развития указанных видов рака. Также это исследование рекомендуют проводить в случаях, когда выявляются злокачественные новообразования на начальных этапах при условии, что опухоль растет быстро.

Зачем нужно проводить анализ

Анализ на BRAF-мутацию при меланоме или других формах злокачественных опухолей проводится для того, чтобы установить истинную причину перерождения клеток.

Такое исследование помогает подобрать таргетную терапию, которая воздействует непосредственно на злокачественную опухоль, приостанавливая развитие последней.

Этот подход снижает вероятность возникновение сопутствующих заболеваний, появление которых обусловлено приемом лекарственных препаратов.

Также анализ на мутацию необходим потому, что неправильно подобранное лечение способно ускорить развитие опухолевого процесса и сократить продолжительность жизни пациента.

Подготовка

Специальной подготовки к анализу на BRAF-мутацию не требуется. Объясняется это тем, что для исследования проводится забор тканей непосредственно из злокачественной опухоли.

Как берут

Для определения мутаций при меланоме потребуется материал, состоящий не менее чем на 20% из перерожденных клеток. Обычно такой биоптат получают в ходе удаления злокачественной опухоли, которую сразу после операции отправляют в лабораторию.

Забранный материал помещается в формалин, а затем — в парафиновые блоки. Перед началом исследования из биоптата делается забор небольшого количества тканей для экстракции ДНК. После этого приступают к анализу материала.

Исследование на BRAF-мутацию проводится с помощью аллель-специфической полимеразно цепной реакции (ПЦР) либо секвентирования ДНК. Для каждой из указанных процедур потребуется небольшой кусок ткани, взятой из зоны поражения.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Материал забирается в рамках хирургического вмешательства по поводу злокачественной опухоли или в ходе биопсии. В каждом из случаев врач отрезает и отправляет на гистологическое исследование кусок ткани. В качестве биоптата также используют и метастазные образования.

Аллель-специфическая ПЦР считается более эффективным методом выявления мутации. Этот способ позволяет с высокой точностью определить наличие изменений. Однако с помощью аллель-специфической ПЦР удается выявить мутацию только в одном гене. Чтобы воссоздать полную картину произошедших изменений, к этой процедуре приходится прибегать повторно.

Выявить точную последовательность мутаций помогает секвентирование ДНК. Для этого анализа также проводится забор тканей из опухоли. Основной недостаток такого метода заключается в том, что в 2-10% случаев секвентирование дает ложноположительный результат. Кроме того, это исследование проводится на дорогостоящем оборудовании, в связи с чем при диагностировании меланомы чаще применяют ПЦР.

Что может исказить результат

Метод секвентированя ДНК в ряде случаев дает ложноположительный результат. К этому приводят ошибки при заборе и транспортировке биоптата, что вызывает деградацию материала.

Расшифровка результата

Результаты анализа на BRAF-мутацию может быть положительным либо отрицательным. То есть это исследование не позволяет определить тип злокачественной опухоли, локализацию и стадию развития новообразования. Поэтому такой метод применяется после того, как был диагностирован рак.

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Анализ на мутацию гена BRAF позволяет отличить следующие формы опухолей:

  • папиллярную от других подобных новообразований и доброкачественных узлов, локализующихся в щитовидной железе;
  • спорадическую от неполипозной колоректальной в толстой кишке;
  • волосатоклеточный лейкоз от других B-клеточных лимфом.

Кроме того, результаты исследования помогают составить примерный прогноз развития опухоли. Большинство новообразований, вызванных мутацией гена BRAF, характеризуются агрессивным ростом. Также это исследование позволяет своевременно исключить из медикаментозной терапии ряд препаратов, которые стимулируют развитие злокачественных опухолей.

Источник: https://onkologia.ru/diagnostika/prochie-metody-diagnostiki/braf-mutatsiya/

БРАФ-мутация при меланоме: BRAF-мутация при меланоме, что делать если BRAF-мутация при меланоме положительная

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

В норме ген BRAF вместе с факторами роста и гормонами участвует в регуляции деления клеток за счет активации специфического сигнального пути. Если же его структура изменяется, то процесс деления выходит из-под контроля. Мутации в гене BRAF выявляются при различных видах рака, однако на первом месте в списке онкологических заболеваний стоит меланома. Определить статус гена при данной болезни крайне важно, так как от этого будет зависеть дальнейшая тактика лечения.

Частота и виды мутаций BRAF

По данным разных авторов, BRAF мутация встречается от 30% до 70% пациентов, которым поставлен диагноз «меланома». При этом изменения в гене могут быть самыми разнообразными.

Всего известно более 40 BRAF мутаций, но наиболее часто (около 90% всех случаев) выявляется замена аминокислоты валина на аминокислоту глутамина в кодоне 600. Соответственно, такая мутация называется BRAF V600E.

Второе по популярности изменение в гене при меланоме – это замена аминокислоты валина на аминокислоту аспарагин в том же кодоне. Такая мутация обозначается V600K.

Методы диагностики

Выявить мутации BRAF можно при помощи молекулярно-генетических методов диагностики. Для проведения исследования необходим образец тканей меланомы кожи, в которых содержится не менее 20% опухолевых клеток.

Читайте также:  Симптомы метастазов в костный мозг

Как правило, такой материал поступает в лабораторию после удаления, после чего он фиксируется в формалине и заключается в парафиновые блоки. Перед определением мутаций необходимо выполнить пробоподготовку.

Материал извлекается из парафина, затем выполняется процесс экстракции ДНК, которая исследуется.

Базовым методом, который позволяет выявить мутации в гене BRAF, является полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Это исследование является относительно простым и дешевым, обладает хорошей чувствительностью и специфичностью, однако имеет существенный недостаток.

Один анализ позволяет определить только одну мутацию BRAF. Если же стоит задача выявить несколько мутаций, то исследование придется повторять.

Более совершенным считается секвенирование, при помощи которого можно установить точную последовательность ДНК целого гена.

Данный метод более затратный и требует дорогостоящего оборудования, но при этом он позволяет одновременно выявить все мутации в гене BRAF за одно исследование.

Среди недостатков секвенирования можно отметить риск получить ложноотрицательный результат (выявляется в 2%-10% случаев) из-за присутствия в материале большого количества нормальных клеток с неизмененной ДНК.

Зачем определять BRAF мутацию при меланоме

Определение мутации в гене BRAF имеет важное значение при подборе лечения меланомы. Одним из современных методов является таргетная терапия, которая направлена на устранение конкретного механизма образования опухолевых клеток.

В случае с меланомой применяются ингибиторы мутированного фрагмента гена BRAF, которые прерывают цепочку биохимических реакций и не дают опухоли развиваться дальше. При назначении таких препаратов определение статуса гена BRAF должно проводиться в обязательном порядке.

При отсутствии мутации дорогостоящее лечение окажется неэффективным, а в некоторых случаях может и ускорить прогрессирование опухолевого процесса.

Препараты из группы ингибиторов BRAF могут применяться только при лечении метастатической меланомы. При этом не изучена эффективность лечения в адъювантном режиме, поэтому такие препараты не назначают пациентам, у которых выполнялось хирургическое удаление опухоли или метастазов, а также химио- и лучевая терапия.

Первыми зарегистрированными препаратами из группы ингибиторов BRAF, которые начали применяться при лечении метастатической и неоперабельной меланомы, стали вемурафениб и дабрафениб.

При проведении клинических испытаний, они показали очень хорошие результаты. В настоящее время применяется комбинированное лечение меланомы, при котором, кроме ингибиторов BRAF назначаются ингибиторы МЕК.

Такое сочетание позволяет максимально замедлить прогрессирование заболевания и увеличить продолжительность жизни пациентов.

Несмотря на большие успехи в лечении меланомы, все еще остаются нерешенными несколько проблем. Во-первых, отсутствуют эффективные методы терапии, которые можно применять при отсутствии мутаций в гене BRAF. Во-вторых, при назначении ингибиторов BRAF у пациентов спустя некоторое время развивается устойчивость к такому лечению, и меланома начинает снова прогрессировать.

Запись
на консультацию
круглосуточно

+7 (495) 151-14-538 800 100 14 98

Источник: https://www.euroonco.ru/oncodermatology/melanoma/braf-mutaciya-pri-melanome

Что показывает онкомаркер BRAF V600, расшифровка анализа

В настоящее время мутация гена BRAF — V600, используется в диагностике меланомы, рака толстого кишечника, рака прямой кишки, но в ближайшем будущем показания для этого теста будут расширены.
Исследуемый материал — ткань опухоли, тест применяется для выбора таргетированной терапии.

Определение мутаций гена BRAF имеет исключительно важное значение для прогноза болезни и лечения для многих видов рака.

Если тест на мутацию гена BRAF положительный, это означает, что V600 мутация найдена.

Интерпретация теста при меланоме

Расшифровка анализа онкомаркера BRAF V600 показывает, что примерно 40-60% кожных меланом имеют разные мутации BRAF. В 90% случаев эти генетические поломки определяются тестом V600.
Существует лекарство — ингибитор (vemurafenib), которое способно подавить мутирование — то есть обладает противоопухолевым эффектом для клеток меланомы, в которых обнаружена мутация V600.

Поэтому для лечения меланомы крайне важно выполнить этот тест.

Рак кишечника

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Выявление микросателитной нестабильности (MSI) — важный фактор в понимании механизма колоректального неполипозного наследственного рака. Полная расшифровка генома — дорогое удовольствие, поэтому генетическое тестирование может быть предложено только выборочно. Пациенты могут быть отобраны с помощью предварительного теста BRAF V600
Наличие мутации BRAF означает, что опухоль нечувствительна к некоторым лекарствам — ингибиторам эпидермального клеточного роста (EGFR). Иногда для уточнения назначают исследование онкомаркера k-ras для подтверждения устойчивости опухоли к анти-EGFR лекарствам.

Определение онкомаркера используют и для прогноза болезни, положительный тест связан с худшим прогнозом.

Рак щитовидной железы

Расшифровка онкомаркера BRAF при опухоли щитовидной железы:

  • Наличие мутации ассоциируется с худшим прогнозом и метастазами

Определение онкомаркера BRAF V600 выполняют и при других видах рака :
Для дифференциального диагноза некоторых форм лейкемии, лимфомы, опухолей легкого, глиомы, печени, желудка, пищевода.

Материал для исследования

Онкомаркер определяют в ткани опухоли. Материал для исследования должен быть доставлен в лабораторию в свежем или замороженном состоянии или в формалине, парафине.
Чаще всего применяют технику определения — реакцию полимеризации в реальном времени, реже различные модификации определения ДНК

Есть ли норма у этого теста

Понятие нормы неуместно, когда мутацию определяют в опухоли. Болезнь уже есть и наличие или отсутствие мутации просто говорит о разных типах опухолей.

В норме данный онкоген принимает участие в контроле за размножением клеток, их ростом и дифференцировкой.
Мутация гена приводит к тому, что эти процессы оказываются бесконтрольными.

Ученые обнаруживает до 30 разных мутаций гена, но тест V600 позволяет определить 90% всех возможных патологических изменений гена.

  • Поломка гена выявляется в 27-70% меланом, в 5-22% колоректального рака, в 36-53% папиллярного рака щитовидной железы, 30% рака яичников и реже в опухолях другой локализации.
  • Теперь, когда мы подробно разобрали, что показывает онкомаркер BRAF V600, поясним, когда этот тест полезен.
  • Определение онкомаркера:
  • позволяет отличить папиллярный рак щитовидной железы от других видов злокачественных опухолей щитовидной железы и доброкачественных узловых образований щитовидной железы;
  • спорадический рак толстой кишки от наследственного неполипозного колоректального рака (HNPCC);
  • волосатоклеточный лейкоз от других В-клеточных лимфом с аналогичными клиническими и морфологическими особенностями;
  • позволяет определить прогноз болезни: раковые заболевания с мутацией BRAF оказываются более агрессивны, чем рак без мутации,  в случаях папиллярного рака щитовидной железы и колоректального рака;
  • помогает в принятии решений о лечении, потому что у больных с распространенным колоректальным раком и положительным тестом на BRAF мутацию, вероятна устойчивость к ингибиторам эпидермального фактора роста (цетуксимабу и панитумумабу);
  • целесообразно для целей таргетированной терапии, так как присутствие мутантного BRAF является ценной терапевтической мишенью, особенно в случае метастатической меланомы.

Исследования в отношении полезности обнаружения онкомаркера BRAF продолжаются.

Тем не менее, в настоящее время, тестирование на BRAF мутацию широко используется только для таргетированной терапии распространенной злокачественной меланомы.

Как будет собрано больше доказательств, определение онкомаркера BRAF мутации может стать стандартом в лечении в диагностике других видов злокачественных заболеваний.

Источник: http://onkomarkery.ru/onkogeny/onkomarker-braf-v600-rasshifrovka-analiza.html

Меланома. Мутация BRAF, или к чему может привести ошибка патоморфолога

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов

Мы знаем, что определение мутаций меланомы играет огромную роль в лечении. Но, как выясняется, важно не только определить «есть BRAF / нет BRAF», но и точно указать подвид самой мутации.  Ну а если это сделать неточно, то человек мало того, что впустую потратит огромные  деньги на бесполезные BRAF-ингибиторы, дык еще и упустит тот момент, когда еще можно начать лечение иммунотерапией.

Белоруссия. Наши дни.

(даты я упускаю. не в них суть)

Здравствуй,подскажите пожалуйста, при метастазах в головной мозг Зельбораф действует или как пишут нет, только по телу.

Добрый вечер!
Обратимся к специалистам: /vse/nabolelo/lechenie-melanomy-zelboraftafinlar-i-metastazy-v-golovnoj-mozg/

Конечно действует

Спасибо вам большое информация очень для меня полезная. К сожалению у нас разрешён только Зельбораф. Надо решать как поступить что было бы лучше в моей ситуации, если из своего опыта можете что нибудь посоветовать буду вам признателен , ещё раз спасибо

Я могу только сказать, что Тафинлар+Мекинист лучше и действенней чем Зелбораф в моно режиме. Если эта комбинация совсем никак, то хотя бы попытайтесь к Зелборафу добавить Котеллик

Добрый день. Два месяца принимали Тафинлар и Мекинист ответ хороший уходит по 1 см в месяц . Покупали за свои. Теперь дали бесплатно Зельбораф моно. Да ещё гама ножом удаляли 3 метастаза в голове. Через месяц МРТ

Естественно, идеальным вариантом было бы продолжение терапии Т+М, раз такой хороший ответ имеется, т.к. никто вам не скажет что будет при переходе на Зелбораф (это не значит что нельзя, МОЖНО, но это значит что действующие вещества все таки разные и ответ может быть разным)
т.е. , точных ответов и конкретного совета у меня нет, к сожалению

В Брюсселе проходит КИ https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02967692 Тафинлар+Мекинист + Плацебо/PDR001 (моноклональное антитело).

Прием идет и уже есть как минимум 1 человек в эти КИ попавший (из Латвии)

+ Эти КИ помимо Брюсселя начинаются и в России

через пару месяцев…

Добрый день! Помогите пожалуйста советом , у нас мутация как теперь выяснилось

BRAF к601е

наши врачи назначили Зельбораф и Котеллик , уже месяц принимаем, по всему стало хуже. рост подкожных метастаз. КТ скорей всего подтвердит.По этой мутации почти ни чего не могу найти, Зельбораф вроде при ней не помогает, мекинист помогает. может у Вас что нибудь есть по этой мутации и какие лекарства на неё действуют.

Доброе утро!
На эту мутацию может подействовать только МЕК ингибитор (Котеллик/Мекинист), да и то …. там какой-то процент небольшой.
Игорь, ну тут только иммунотерапия остается.

Читайте также:  Кашель при химиотерапии: чем лечить, принципы диеты

А вообще, получается что Мекинист все таки помогал. Блин, а как так получилось что с мутацией так напортачили?

Источник: https://www.vladlive.com/vse/nabolelo/melanoma-mutaciya-braf-ili-k-chemu-mozhet-privesti-oshibka-patomorfologa/

BRAF-мутация, или какие нужны исследования, чтобы эффективно лечить меланому

BRAF-мутация при меланоме (БРАФ): что это, кому нужен анализ, подготовка, расшифровка результатов ТАРГЕТНАЯ ТЕРАПИЯ РАКА — Меланома, как и любое онкологическое заболевание не развивается на пустом месте. Исследования последних десятилетий показали, что перерождение здоровой клетки в раковую сопровождается поломками (мутациями) генов отвечающих за рост, деление и/или самоуничтожение клеток (апоптоз). В среднем, для злокачественного перерождения требуется 4-6 таких мутаций. Однако, есть гены, влияние которых на процессы роста клеток настолько сильно, что одной мутации в них достаточно для перерождения и поддержания роста опухоли без внешних ростовых сигналов.

Одним из таких генов является BRAF, мутации в котором обнаруживаются у 40% пациентов с меланомой. BRAF – один из белков основного сигнального пути, который активирует рост клеток. В норме с рецептором (EGFR) на поверхности клетки взаимодействует фактор роста и запускает ростовой сигнал, который передается по цепочке белков (один из которых BRAF) в ядро клетки. В случае, если происходит мутация в гене BRAF, он передает ростовой сигнал постоянно, независимо от внешних сигналов. Это приводит к бесконтрольному делению клеток и образованию опухоли.

В настоящее время существуют препараты, которые способны блокировать поломку таких генов и тем самым останавливать рост опухоли. Эти препараты называются таргетными (от англ. Target – мишень). Таргетные препараты действуют исключительно на опухоль с данной мутацией, а не просто на любые быстро размножающиеся клетки организма, как это происходит при традиционной химио- и радиохимиотерапии. Таргетный подход, точное попадание препарата именно в опухолевую клетку, позволяет значительно повысить эффективность лечения меланомы, уменьшив при этом побочные явления. 

Такие препараты существуют и довольно широко применяются для лечения больных меланомами, в частности, Зелбораф (Вемурафениб). Однако прежде чем подарить пациенту надежду, необходимо быть уверенным в том, что в опухоли есть мутация гена BRAF V600, которая позволит химиопрепарату выявить “врага”.

Также, довольно высокую эффективность имеет таргетная терапия, если у пациента диагностирован колоректальный рак.

В настоящее время по международным стандартам для больных с III или IV стадии меланомы, а также колоректального рака при отсутствии мутации в гене KRAS, онколог должен предложить определение наличия мутации гена BRAF. На усмотрение врача, исследование может быть выполнено и на более ранних стадиях, в таком случае при прогрессии заболевания лечение может быть начато незамедлительно.

В Украине анализ на “BRAF-мутацию”, как часто называют это исследование (полное наименование звучит как “ определение мутаций в гене B-Raf V600, полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (RT-PCR) для рака толстой и прямой кишки (РТПК) и меланомы ), делают только в Киеве, поэтому, к сожалению, многие онкологи не назначают и не рекомендуют его проведение, что существенно снижает шансы на выздоровление, если вместо таргетной терапии, пациент получает обычное лечение.

Тем более, что само исследование на BRAF-мутацию проводится в молекулярно-диагностической лаборатории и не требует никаких дополнительных хирургических манипуляций. Оно проводится на ткани опухоли, которая была удалена во время операции и исследовалась в гистологической лаборатории.

Таким образом, пациенту необходимо взять в той лаборатории (чаще всего при местном онкоцентре), в которой проводилось гистологическое исследование, парафиновый блок с его материалом на консультацию и предоставить его в молекулярную лабораторию.

Стоит отметить, что для молекулярного исследования подходит как первичная опухоль на коже, так и её метастазы. 

Важным моментом является то, что для выполнения молекулярного исследования (анализа на BRAF-мутацию) необходимо достаточное количество генетического материала (ДНК) и его сохранность.

Поэтому, с одной стороны, важно чтобы в гистологической лаборатории соблюдали все правила обработки материала, а с другой – высокое качество оборудования и реактивов молекулярной лаборатории, что позволит выявить мутации в наименьшем количестве исходного материала.

Заботьтесь о своем здоровье и помните, что правильный диагноз – залог успешного и эффективного лечения.

Статья предоставлена диагностическим центром CSD Health Care (Киев)

Источник: http://oncoportal.net/stati/braf-mutatsiya-ili-kakie-nugeni-issledovaniya-chtobi-ieffektivno-lechit-melanomu.html

Определение мутации гена BRAF в тканях опухолей

[12-066] Определение мутации гена BRAF в тканях опухолей

14300 руб.

  • Молекулярно-генетическое исследование биоптата опухолевой ткани для определения специфической мутации, которая играет роль в злокачественной трансформации клеток.
  • Синонимы русские
  • Генные мутации при меланоме, белок сигнального пути.
  • Синонимы английские
  • BRAF Mutation Testing, BRAF Gene Mutation Test, BRAF Gene Mutation Analysis.
  • Метод исследования
  • Автоматическое секвенирование.
  • Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат опухолевой ткани в емкости с фиксирующим раствором или парафиновый блок с биоптатом ткани опухоли. Может использоваться как образец первичной опухоли, так и полученный из метастатического очага.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Современные успехи в лечении онкологических заболеваний во многом связаны с обнаружением молекулярных механизмов возникновения и развития злокачественных новообразований, отличающих их от клеток нормальных тканей, и появлением лекарственных препаратов, способных воздействовать на них. Такие лекарства называются таргетными, то есть действующими на определенную «цель» в опухолевой клетке. Они обладают хорошим профилем безопасности, так как, в отличие от стандартной химиотерапии, практически не действуют на нормальные ткани и характеризуются большей эффективностью. Однако назначение таргетных препаратов возможно лишь при обнаружении в опухолевых клетках специфической мишени для их действия. Кроме того, обнаружение в опухолевых клетках определенных генетических аномалий может использоваться как прогностический фактор.

Сравнительно часто патологическим механизмом злокачественной трансформации клеток является нарушение в так называемых сигнальных путях. Сигнальный путь представляет собой цепь, по которой активирующий сигнал от рецептора, располагающегося на поверхности клетки, через несколько внутриклеточных белков передается в ядро.

Одним из таких сигнальных путей является МАРК (Mitogen-activated proteinkinase). Внеклеточные сигналы (факторы роста, гормоны), связываясь с рецептором, активируют путь МАРК, что в свою очередь приводит к активации в клеточном ядре генов, ответственных за пролиферацию. Каскад сигнального пути МАРК включает в себя белки четырех семейств: RAS, RAF, MEK и ERK.

Семейство RAF представлено тремя белками — ARAF, BRAF и CRAF, — наибольшей активностью из них обладает BRAF. В норме сигнальный путь активируется только через связывание рецептора со специфической молекулой. Однако при возникновении точечных мутаций в генах, кодирующих сигнальные белки, они могут приобретать новые свойства.

Так, при определенных мутациях гена BRAF этот белок становится способным активировать сигнальный путь независимо от рецептора и запускать процесс неконтролируемого клеточного деления.

Мутации гена BRAF характерны для меланом кожи (по разным данным, от 30 до 70%), колоректального рака, немелкоклеточного рака легкого (около 3%), а также для папиллярного рака щитовидной железы.

Наиболее часто выявляется мутация гена BRAF V600E, вторая по частоте V600K, значительно реже встречаются V600D и V600R. Буквы в обозначении данных мутаций означают замену нормальной аминокислоты (валина) в шестисотом положении белка на другую.

После открытия роли мутаций гена BRAF в патогенезе опухолей, в том числе меланомы, были разработаны новые препараты – низкомолекулярные ингибиторы мутированного фермента BRAF.

Эли лекарственные средства блокируют патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и тормозят развитие опухоли. К BRAF-ингибиторам относятся вемурафениб (зелбораф) и дабрафениб.

Материалом для исследования служит ДНК опухолевых клеток. Она может быть выделена из биоптата опухоли, находящегося в парафиновом блоке. Если же на исследование предоставлен образец опухоли в емкости с фиксирующим раствором, из него изготавливаются парафиновые блоки для возможности длительного хранения и использования в последующем для других диагностических тестов.

Для чего используется исследование?

  • Для определения показаний к назначению низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF.

Когда назначается исследование?

  • Пациентам с неоперабельной или метастатической меланомой (стадии IIIC – IV), а также распространенным немелкоклеточным раком легкого при отсутствии мутации гена EGFR.

Что означают результаты?

  • Положительный результат — мутация обнаружена. Также указывается вид выявленной мутации.
  • Отрицательный результат – мутации не обнаружены.
  1. Что может влиять на результат?
  2. Нарушение техники фиксации биопсийного материала, которое может привести к деградации генетического материала и невозможности тестирования.
  3. Важные замечания



  • Воздействие BRAF-ингибиторов на опухолевые клетки с отсутствием мутаций в гене данного белка может, наоборот, сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Поэтому исключительно важно проводить диагностику мутационного статуса BRAF. BRAF-ингибиторы не должны назначаться в тех случаях, когда мутация не обнаружена или ее статус достоверно неизвестен.

Также рекомендуется

  • Цитологическое исследование материала, полученного при оперативном вмешательстве
  • Цитологическое исследование материала, полученного при эндоскопии (бронхоскопия)
  • Гистологическое исследование биопсийного материала
  • Гистологическое исследование доброкачественных образований кожи (папилломы, невусы и др.)
  • Гистологическое исследование биоптата лимфатического узла (1 узел) с использованием рутинных методик окраски
  • Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом ИГХ
  • Кто назначает исследование?
  • Онколог, химиотерапевт.
  • Литература
  1. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e  by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1512-1513.

  2. The Basic science of Oncology. Fifth edition. Ian F. Tannock, Robert G. Bristow, Richard P. Hill, Lea Harrington. McGrow-Hill Education, 2013. Pages 173-179.

  3. Программа RUSSCO «Совершенствование молекулярно-генетической диагностики в российской федерации». Практическое руководство для врачей. www.cancergenome.ru

  4. Доклад «Современные возможности таргетной терапии НМРЛ», Имянитов Е. Н. Вестник московского онкологического общества, №11 (602), 2013. С. 3-6.

Источник: https://helix.ru/kb/item/12-066

Ссылка на основную публикацию